1.Επιλογή της σωστής κυτταρικής γραμμής
Όταν επιλέγετε την κατάλληλη κυτταρική γραμμή για το πείραμά σας, λάβετε υπόψη τα ακόλουθα κριτήρια:
α.Είδος: Οι κυτταρικές σειρές πλην του ανθρώπου και των πρωτευόντων έχουν συνήθως λιγότερους περιορισμούς βιοασφάλειας, αλλά στο τέλος το πείραμά σας θα καθορίσει εάν θα χρησιμοποιηθεί μια καλλιέργεια ενός συγκεκριμένου είδους.
β. Χαρακτηριστικά: Ποιος είναι ο σκοπός του πειράματός σας;Για παράδειγμα, κυτταρικές σειρές που προέρχονται από ήπαρ και νεφρό μπορεί να είναι πιο κατάλληλες για δοκιμές τοξικότητας.
γ.Περιορισμένη ή συνεχής: Αν και η επιλογή από μια περιορισμένη κυτταρική σειρά μπορεί να σας παρέχει περισσότερες επιλογές για την έκφραση της σωστής λειτουργίας, οι συνεχείς κυτταρικές σειρές είναι γενικά πιο εύκολο να κλωνοποιηθούν και να διατηρηθούν.
δ. Φυσιολογικές ή μετασχηματισμένες: Οι μετασχηματισμένες κυτταρικές σειρές έχουν συνήθως υψηλότερο ρυθμό ανάπτυξης και υψηλότερη απόδοση σποράς, είναι συνεχείς και απαιτούν λιγότερο ορό στο μέσο καλλιέργειας, αλλά ο φαινότυπος τους έχει υποστεί μόνιμες αλλαγές μέσω γενετικού μετασχηματισμού.
ε. Συνθήκες και χαρακτηριστικά ανάπτυξης: Ποιες είναι οι απαιτήσεις σας για την ταχύτητα ανάπτυξης, την πυκνότητα κορεσμού, την αποτελεσματικότητα της κλωνοποίησης και την ικανότητα ανάπτυξης σε αναστολή;Για παράδειγμα, για να εκφράσετε ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες σε υψηλές αποδόσεις, μπορεί να χρειαστεί να επιλέξετε κυτταρικές σειρές που έχουν γρήγορους ρυθμούς ανάπτυξης και την ικανότητα να αναπτύσσονται σε εναιώρημα.
στ. Άλλα κριτήρια: Εάν χρησιμοποιείτε περιορισμένη κυτταρική γραμμή, υπάρχει αρκετό διαθέσιμο απόθεμα;Χαρακτηρίζεται πλήρως η κυτταρική σειρά ή πρέπει να το επαληθεύσετε μόνοι σας;Εάν χρησιμοποιείτε μη φυσιολογική κυτταρική σειρά, υπάρχει ισοδύναμη φυσιολογική κυτταρική σειρά που μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως έλεγχος;Είναι η κυτταρική σειρά σταθερή;Εάν όχι, πόσο εύκολο είναι να το κλωνοποιήσετε και να δημιουργήσετε αρκετό κατεψυγμένο απόθεμα για το πείραμά σας;
2. Αποκτήστε κυτταρικές σειρές
Μπορείτε να δημιουργήσετε τη δική σας καλλιέργεια από πρωτεύοντα κύτταρα ή μπορείτε να επιλέξετε να αγοράσετε καθιερωμένες κυτταροκαλλιέργειες από εμπορικούς ή μη κερδοσκοπικούς προμηθευτές (π.χ. τράπεζες κυττάρων).Οι αξιόπιστοι προμηθευτές παρέχουν κυτταρικές σειρές υψηλής ποιότητας που έχουν ελεγχθεί προσεκτικά για ακεραιότητα και διασφαλίζουν ότι η καλλιέργεια είναι απαλλαγμένη από μολυντές.Συνιστούμε να μην δανείζεστε καλλιέργειες από άλλα εργαστήρια γιατί έχουν υψηλό κίνδυνο μόλυνσης από κυτταροκαλλιέργειες.Ανεξάρτητα από την πηγή του, βεβαιωθείτε ότι όλες οι νέες κυτταρικές σειρές έχουν ελεγχθεί για μόλυνση από μυκόπλασμα προτού αρχίσετε να το χρησιμοποιείτε.
Ώρα δημοσίευσης: Φεβ-01-2023